呼吸(xī)道九聯(lián)檢一般(bān)采用間接免(miǎn)疫熒光(guāng)法，通過熒光(guāng)素標記的抗人球蛋白(bái)與抗(kàng)原(yuán)抗體復合物(wù)反應(yīng)，用免(miǎn)疫(yì)熒(yíng)光顯微鏡觀(guān)察(chá)結果。

免(miǎn)疫熒光(guāng)顯微(wēi)鏡檢測呼吸道九(jiǔ)聯(lián)檢(jiǎn)要用幾組熒光(guāng)
？

在呼(hū)吸道(dào)九聯(lián)檢的熒光檢測中(zhōng)，熒光(guāng)信號的(dí)激(jī)發(fā)與(yǔ)識(shí)別(bié)依(yī)賴特(tè)定波長的(dí)光波段，核(hé)心圍繞(rào)“激發光(guāng)（讓(ràng)熒(yíng)光素發(fā)光的光）"和“發射光（熒(yíng)光(guāng)素(sù)實(shí)際(jì)發出的(dí)光）"兩個關(guān)鍵環(huán)節，具體波段選擇(zé)與檢(jiǎn)測(cè)中使(shǐ)用的熒光素種類直接(jiē)綁(bǎng)定（臨床常(cháng)用的是(shì)異硫(liú)氰(qíng)酸(suān)熒光素FITC）。

正置三(sān)色熒(yíng)光(guāng)模(mó)塊匹配奧林(lín)巴斯BX53顯微鏡應(yīng)用於(yú)廣州(zhōu)某三(sān)甲(jiǎ)醫(yī)院(yuàn)呼吸道病(bìng)毒檢測(cè)

用(yòng)藍(lán)光(guāng)激發FITC熒光素(sù)→熒光素釋(shì)放(fàng)綠光(guāng)（陽性(xìng)信號(hào)），同(tóng)時背(bèi)景(jǐng)染(rǎn)料釋(shì)放紅光→顯微鏡(jìng)通過(guò)濾片組篩(shāi)選(xuǎn)出這兩(liǎng)種光，最終(zhōng)呈現(xiàn)“綠信號(hào)（病(bìng)原(yuán)體陽(yáng)性(xìng)）+紅(hóng)背(bèi)景(jǐng)（陰性(xìng)區域(yù)）"的清晰視野，波段無(wú)重(zhòng)疊，不會幹(gān)擾陽性信號(hào)的(dí)識(shí)別，醫生(shēng)能(néng)通過“紅光(guāng)背景中的綠光斑點"快(kuài)速定位陽性區域(yù)。

激發光 465-495nm（藍光(guāng)） 熒光(guāng)素（FITC）需要(yào)吸(xī)收特定能量(liáng)的(dí)光(guāng)才(cái)能(néng)“被(bèi)激活"，465-495nm的(dí)藍光恰好(hǎo)能提供(gōng)其(qí)所需能(néng)量(liáng)，促(cù)使FITC的電子(zǐ)從(cóng)“基態(tài)"躍(yuè)遷到“激發態"。

發射(shè)光 515-535nm（綠光） 激發(fā)態(tài)的(dí)電(diàn)子(zǐ)不穩定，會快(kuài)速(sù)回(huí)到基態並(bìng)釋放能量(liáng)，能量以(yǐ)“光(guāng)"的形(xíng)式釋(shì)放，即(jí)發出515-535nm的綠光，這(zhè)也(yě)是顯微(wēi)鏡下觀察到的“陽性信號色"。

背(bèi)景染料(liào)的(dí)波(bō)段(duàn)：紅(hóng)色(sè)信號(hào)用於(yú)定位(wèi)與對比

為(wéi)了(liǎo)避免“熒光(guāng)信號(hào)淹沒(méi)在(zài)背(bèi)景(jǐng)中"，試劑(jì)盒會添(tiān)加紅色背(bèi)景(jǐng)染料（如碘(diǎn)化(huà)丙啶PI，EvansBlue），其作用是(shì)給“非目標區域(yù)"（如(rú)細胞，載玻片背(bèi)景(jǐng)）染(rǎn)色，形成(chéng)“綠信(xìn)號（陽性(xìng)）+紅背景(jǐng)（陰(yīn)性(xìng)）"的(dí)清(qīng)晰對比(bǐ)。

很多(duō)用戶(hù)選(xuǎn)擇在已(yǐ)有(yǒu)的(dí)生物(wù)顯(xiǎn)微鏡升(shēng)級改(gǎi)造(zào)為熒(yíng)光顯微鏡，利(lì)用LED熒光(guāng)模(mó)塊(kuài)將(jiāng)普(pǔ)通生物(wù)顯(xiǎn)微鏡(jìng)改造為適(shì)用於呼吸(xī)道(dào)九(jiǔ)聯檢(jiǎn)的(dí)熒光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)，是臨床(chuáng)檢測中(zhōng)低(dī)成(chéng)本，高(gāo)效的(dí)方案。選擇升級LED熒光(guāng)模(mó)塊，主(zhǔ)要是因為其具(jù)有(yǒu)熒光(guāng)效果好，操作簡(jiǎn)便(biàn)，使用壽(shòu)命長，成(chéng)本效益高等優(yōu)勢(shì)，能夠有(yǒu)效提升(shēng)醫(yī)院(yuàn)的檢(jiǎn)測水(shuǐ)平和(hé)工(gōng)作效(xiào)率(shuài)。

廣州明慧提供LED熒光模塊升(shēng)級熒光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)，替代傳統激(jī)發光(guāng)源，具(jù)備(bèi)穩(wěn)定(dìng)，低(dī)發熱，壽(shòu)命(mìng)長的優勢(shì)，傳統(tǒng)汞(gǒng)燈(dēng)需預熱(rè)且壽(shòu)命短，LED更適(shì)合臨(lín)床高頻使(shǐ)用(yòng)，該(gāi)方(fāng)案成(chéng)本(běn)僅為(wéi)專業熒(yíng)光顯微鏡的1/5-1/3，且(qiě)操作便捷，維護(hù)成本低(dī)，特(tè)別(bié)適合(hé)醫院或應急檢測(cè)場景的快速部署免疫熒光(guāng)顯(xiǎn)微鏡檢(jiǎn)測呼(hū)吸(xī)道(dào)九聯檢。