支(zhī)原體(tǐ)是一類尺(chǐ)寸介(jiè)乎細菌和病毒(dú)之間(jiān)的原(yuán)核細胞型病原(yuán)微生物，沒有細胞(bāo)壁，形態多樣(yàng)，一般(bān)致(zhì)病性弱(ruò)，主要黏附(fù)在(zài)細(xì)胞膜(mó)上(shàng)獲取營養(yǎng)，損傷(shāng)細胞(bāo)膜(mó)，影響細胞(bāo)正常生(shēng)命活(huó)動，進而(ér)引(yǐn)起泌(mì)尿(niào)係統(tǒng)感(gǎn)染，沙眼，肺炎(yán)等(děng)疾病(bìng)。支(zhī)原(yuán)體(tǐ)直(zhí)徑(jìng)為0.2~0.3μm，結構簡單(dān)，球形，具有較大的可變性，使用光學顯微鏡(jìng)高(gāo)倍相(xiāng)襯觀(guān)察(chá)，如(rú)果(guǒ)看(kàn)到細(xì)胞核(hé)周(zhōu)圍大(dà)量(liáng)靜止或布(bù)朗運動的小黑(hēi)點，可以(yǐ)推斷(duàn)大(dà)概率(shuài)為(wéi)支原體。以(yǐ)下是使(shǐ)用相差生(shēng)物(wù)顯微鏡和(hé)熒光(guāng)生物顯微(wēi)鏡觀(guān)察(chá)支原(yuán)體(tǐ)的具(jù)體方(fāng)法：

一，相差顯微鏡觀察

生(shēng)物(wù)顯微鏡(jìng)MHL2800

相差(chà)顯微鏡(jìng)能夠(gòu)觀(guān)察活(huó)細胞和(hé)未染色的(dí)標本(běn)，可以觀察到(dào)支(zhī)原體呈暗色微小顆粒，有(yǒu)類似(sì)布(bù)朗(lǎng)運(yùn)動的表現(xiàn)，在(zài)細胞(bāo)表麵或細(xì)胞之(zhī)間遊離或成群分布(bù)的形態(tài)和(hé)排列方(fāng)式。支原(yuán)體(tǐ)與細(xì)胞破碎後溢(yì)出(chū)的(dí)細胞內容(róng)物(wù)如綫粒體(tǐ)等頗相似，應(yīng)細(xì)加(jiā)區別(bié)。

二，熒光(guāng)顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)觀(guān)察

熒(yíng)光(guāng)顯微鏡(jìng)UB203i-FL

熒光顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)觀察需要使(shǐ)用特(tè)殊的(dí)熒光染(rǎn)料或(huò)抗(kàng)體(tǐ)對(duì)支原(yuán)體(tǐ)進行(háng)標(biāo)記(jì)，根(gēn)據(jù)熒(yíng)光反應判斷(duàn)是(shì)否(fǒu)感染。支原體屬(shǔ)於原核生物(wù)，可以(yǐ)使(shǐ)用DAPI等(děng)細胞(bāo)核(hé)熒光染(rǎn)色(sè)劑染(rǎn)色，還可以使用相差(chà)熒光染料(liào)或抗體標(biāo)記。一般來說，支原(yuán)體感染(rǎn)的(dí)細胞(bāo)在熒(yíng)光(guāng)顯(xiǎn)微鏡下會(huì)呈(chéng)現(xiàn)出(chū)綠色(sè)或(huò)紅(hóng)色熒光(guāng)，這取(qǔ)決於所使用的熒(yíng)光染(rǎn)料和(hé)抗體(tǐ)。

應(yīng)用(yòng)實例(lì)：在(zài)呼吸(xī)道(dào)九聯檢查(chá)中(zhōng)，包含支原體(tǐ)肺(fèi)炎(yán)檢測。使用熒光(guāng)顯(xiǎn)微(wēi)鏡觀(guān)察時，如果觀(guān)察(chá)到紅色細(xì)胞外圍出(chū)現(xiàn)明亮(liàng)的綠色熒光反(fǎn)應，且形(xíng)態為明(míng)顯的細(xì)胞膜或(huò)者胞漿(jiāng)，則可以判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，這些綠色(sè)的熒(yíng)光信號標記(jì)的就是(shì)肺炎支(zhī)原體(tǐ)。相(xiāng)反(fǎn)，如(rú)果(guǒ)紅(hóng)色(sè)細胞(bāo)周圍無(wú)熒(yíng)光或(huò)少(shǎo)量(liáng)綠色熒(yíng)光(guāng)，且熒光(guāng)較(jiào)弱(ruò)，則判定為陰(yīn)性，這(zhè)意味著(zhuó)樣本中未檢測(cè)到肺炎支(zhī)原(yuán)體。

三，觀察(chá)注意事項

支原(yuán)體主(zhǔ)要(yào)黏附在細胞膜(mó)上生存，沒(méi)有細胞(bāo)壁(bì)，通常呈圓形(xíng)或橢(tuǒ)圓(yuán)形(xíng)，一(yī)般呈末(mò)端尖銳，表麵有許多小(xiǎo)突起的形(xíng)態特征(zhēng)。

在觀察(chá)過(guò)程中，應注意(yì)區(qū)分(fēn)支原(yuán)體(tǐ)與(yǔ)其(qí)他(tā)細(xì)胞(bāo)結(jié)構或(huò)汙(wū)染物。

熒光顯微(wēi)鏡觀察(chá)診斷支(zhī)原體(tǐ)肺炎屬於(yú)血清學檢測，要(yào)等發(fā)病後4~7日(rì)，體(tǐ)內(nèi)產生免疫反(fǎn)應(yīng)才能檢測出(chū)來(lái)，主(zhǔ)要(yào)適合首診(zhěn)檢(jiǎn)測陰(yīn)性，復診(zhěn)仍然懷(huái)疑肺(fèi)炎支(zhī)原(yuán)體(tǐ)感染(rǎn)的(dí)情況。

通過(guò)相差(chà)顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)和熒光(guāng)顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)的(dí)觀(guān)察，可以更深入(rù)地(dì)了(liǎo)解(jiě)支(zhī)原體(tǐ)的形(xíng)態(tài)，分(fēn)布和(hé)感(gǎn)染(rǎn)情況，為疾病(bìng)的診斷和(hé)治(zhì)療提(tí)供有力支持。