支原(yuán)體(tǐ)感染(rǎn)的觀察(chá)與(yǔ)檢測：相(xiāng)差顯微(wēi)鏡與(yǔ)熒光(guāng)顯微(wēi)鏡的應(yīng)用

支(zhī)原體是一(yī)種常見的病(bìng)原(yuán)體(tǐ)，可引起各種疾病(bìng)，其中最(zuì)常見(jiàn)的(dí)是肺炎(yán)。支原體可(kě)獨立(lì)存(cún)活(huó)，不侵入(rù)機(jī)體組織與(yǔ)血(xiě)液(yè)，直徑(jìng)0.2～0.3um，結(jié)構(gòu)簡單(dān)，球(qiú)形(xíng)，沒有細胞壁，隻有(yǒu)三層結(jié)構的細(xì)胞(bāo)膜(mó)，故具有(yǒu)較大的(dí)可(kě)變(biàn)性(xìng)，因此支原體感染的檢測(cè)對於診斷(duàn)和(hé)治療(liáo)支(zhī)原(yuán)體引(yǐn)起的疾(jí)病(bìng)至關重要(yào)。

支原(yuán)體(tǐ)主要黏(nián)附在細胞膜上生存(cún)，沒(méi)有(yǒu)細(xì)胞(bāo)壁(bì)，通(tōng)常呈圓(yuán)形或(huò)橢圓形(xíng)，一(yī)般呈末端(duān)尖銳，表麵有許(xǔ)多(duō)小突起的(dí)形態特(tè)征(zhēng)，可以(yǐ)使用(yòng)相差(chà)顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)或者(zhě)熒光顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)觀察檢測(cè)支原體(tǐ)，有(yǒu)助於(yú)診(zhěn)斷(duàn)和治(zhì)療(liáo)支(zhī)原體引起的(dí)疾(jí)病(bìng)。（注(zhù)意事項：支(zhī)原(yuán)體與細胞(bāo)破碎(suì)後(hòu)溢出(chū)的(dí)細胞內(nèi)容物如綫(xiàn)粒體(tǐ)等頗(pō)相似，應(yīng)細(xì)加區(qū)別。）

1.相差顯(xiǎn)微鏡檢測法(fǎ)

相差(chà)顯微鏡能(néng)夠(gòu)觀(guān)察(chá)活(huó)細(xì)胞和未(wèi)染(rǎn)色的標本，可以(yǐ)觀察到支(zhī)原體呈暗(àn)色微(wēi)小顆(kē)粒(lì)，有(yǒu)類似布朗運(yùn)動的表現(xiàn)，在細胞表麵或(huò)細胞之(zhī)間遊(yóu)離(lí)或成群分布的(dí)形態和排列(liè)方(fāng)式。

2.熒(yíng)光顯(xiǎn)微(wēi)鏡檢(jiǎn)測(cè)法

熒光顯微鏡(jìng)觀察需要使用特(tè)殊(shū)的(dí)熒光(guāng)染(rǎn)料(liào)或抗(kàng)體對支(zhī)原體(tǐ)進行標記(jì)，根(gēn)據熒(yíng)光反應判(pàn)斷是(shì)否(fǒu)感染(rǎn)。一般來說，支原(yuán)體感染的(dí)細(xì)胞在(zài)熒光(guāng)顯微鏡(jìng)下(xià)會(huì)呈現出(chū)綠(lǜ)色或紅(hóng)色熒光，這取(qǔ)決(jué)於所使(shǐ)用的熒光(guāng)染(rǎn)料(liào)和抗體。

在呼(hū)吸道(dào)九(jiǔ)聯檢查中也(yě)包(bāo)含支原體(tǐ)肺(fèi)炎檢(jiǎn)測(cè)，在(zài)熒光顯(xiǎn)微鏡下，如(rú)果觀察(chá)到紅色(sè)細(xì)胞(bāo)外(wài)圍出(chū)現(xiàn)明(míng)亮(liàng)的(dí)綠色熒(yíng)光反(fǎn)應，且形態為(wéi)明(míng)顯的(dí)細胞膜或(huò)者胞漿，則可以判定(dìng)為陽性，這(zhè)些綠色的熒光信號標記的(dí)就是肺(fèi)炎支原(yuán)體(tǐ)。這是(shì)因(yīn)為(wéi)肺炎支(zhī)原體在受到(dào)特(tè)定(dìng)熒光(guāng)染料的標記(jì)後(hòu)，會發(fā)出綠色熒光。

相反，如果紅色(sè)細胞周圍(wéi)無(wú)熒光或少(shǎo)量(liáng)綠(lǜ)色熒(yíng)光，且熒(yíng)光(guāng)較弱，則(zé)判定(dìng)為陰性，這(zhè)意味(wèi)著樣(yàng)本中未(wèi)檢測到肺(fèi)炎支(zhī)原(yuán)體(tǐ)。

適用(yòng)觀察(chá)檢測(cè)支(zhī)原體，提供明場，暗場(cháng)，相襯的通用聚光鏡，可(kě)選(xuǎn)配落(là)射式(shì)垂(chuí)直熒光(guāng)照(zhào)明(míng)器，光源(yuán)采(cǎi)用(yòng) LED 光源，便於得到高分(fēn)辨率(shuài)，高對(duì)比(bǐ)度的(dí)圖(tú)像。

熒(yíng)光顯微鏡觀察診斷支原(yuán)體(tǐ)肺(fèi)炎適合於(yú)各種(zhǒng)臨床情(qíng)況(kuàng)，尤(yóu)其適(shì)用(yòng)於首診檢測(cè)陰性，但(dàn)復診仍(réng)然懷(huái)疑(yí)肺(fèi)炎支原體(tǐ)感染(rǎn)的(dí)情況。由於(yú)其操(cāo)作簡(jiǎn)便(biàn)，結果直觀，因此(cǐ)成為一種簡單(dān)，直觀，容易(yì)實現的觀察(chá)和(hé)診斷方(fāng)式(shì)。