淺談(tán)激(jī)光共聚(jù)焦顯(xiǎn)微(wēi)鏡的特點(diǎn)
更新時間:2023-05-17 點擊(jī)次數:2391
激光掃(sǎo)描(miáo)共聚焦(jiāo)顯微(wēi)技術已用於細胞形態定位,立體(tǐ)結構重(zhòng)組,動態變化過程(chéng)等(děng)研(yán)究,並(bìng)提(tí)供定量(liáng)熒光測定,定量圖(tú)像分(fēn)析等實(shí)用研究手(shǒu)段,結合其他相關生物技術,在(zài)形態學,生理學(xué),免疫學,遺(yí)傳學等(děng)分(fēn)子細胞生(shēng)物學領域(yù) 得到(dào)廣泛應(yīng)用。
激光(guāng)共聚焦(jiāo)顯(xiǎn)微鏡:在熒光顯微(wēi)鏡(jìng)成(chéng)象(xiàng)的(dí)基(jī)礎上加裝激光掃描裝置,使用紫(zǐ)外(wài)光或(huò)可(kě)見(jiàn)光激(jī)發熒(yíng)光(guāng)探針(zhēn)。利用(yòng)計算機(jī)進行圖(tú)象處(chǔ)理(lǐ),從(cóng)而得(dé)到(dào)細(xì)胞或組織內(nèi)部微細結構(gòu)的(dí)熒(yíng)光圖象,以及(jí)在(zài)亞(yà)細胞水(shuǐ)平上觀察諸如Ca2+,pH值(zhí),膜電(diàn)位(wèi)等生理(lǐ)信號及(jí)細(xì)胞形態的變(biàn)化(huà)。
激光(guāng)共(gòng)聚焦(jiāo)顯(xiǎn)微(wēi)鏡利用激(jī)光束經(jīng)照明(míng)針孔形(xíng)成(chéng)點(diǎn)光源(yuán)對標本(běn)內焦平(píng)麵的(dí)每一(yī)點(diǎn)掃(sǎo)描,標本上的被照射點,在(zài)探測(cè)針孔(kǒng)處成(chéng)像,由探(tàn)測針(zhēn)孔(kǒng)後的光點(diǎn)倍增管(guǎn)(PMT)或(huò)冷電耦器件(jiàn)(cCCD)逐(zhú)點(diǎn)或(huò)逐綫(xiàn)接收(shōu),迅速(sù)在計(jì)算機監視器(qì)屏(píng)幕上(shàng)形成熒(yíng)光(guāng)圖像。
照明針孔與(yǔ)探(tàn)測(cè)針孔(kǒng)相對(duì)於物鏡(jìng)焦(jiāo)平麵(miàn)是共軛的,焦平麵上的點同時聚焦於照(zhào)明(míng)針孔(kǒng)和發射(shè)針(zhēn)孔(kǒng),焦(jiāo)平(píng)麵(miàn)以外(wài)的點不會(huì)在探(tàn)測針(zhēn)孔處(chǔ)成像,這樣得到的(dí)共聚焦圖(tú)像(xiàng)是標本的(dí)光(guāng)學橫斷(duàn)麵,克服了(liǎo)普(pǔ)通顯微鏡圖(tú)像(xiàng)模(mó)糊的(dí)缺點。