激光(guāng)共(gòng)聚(jù)焦顯微(wēi)鏡的定義(yì)及優(yōu)點(diǎn)
更(gēng)新時(shí)間(jiān):2023-03-14 點(diǎn)擊次數(shù):3015
激(jī)光共聚焦顯微(wēi)鏡和掃描電鏡都(dū)是(shì)點源逐點掃(sǎo)描成(chéng)像,通(tōng)過控製(zhì)掃描(miáo)驅動(dòng)範圍(wéi),調(tiáo)節放(fàng)大倍數。激光共(gòng)聚(jù)焦(jiāo)顯微(wēi)鏡(jìng)是通(tōng)過(guò)激光掃(sǎo)描的方(fāng)式(shì)工(gōng)作(zuò),可(kě)以(yǐ)獲(huò)得(dé)三維圖(tú)像。掃描電(diàn)鏡是利(lì)用細聚焦電子束(shù)在樣品表麵(miàn)掃(sǎo)描(miáo)時激發(fā)出(chū)來的各種物(wù)理信(xìn)號(hào)來調製成像(xiàng)的,隻(zhī)能得到二維圖(tú)像(xiàng),不能得到三維圖像。
激光共(gòng)聚(jù)焦顯(xiǎn)微鏡利(lì)用激(jī)光束經(jīng)照明(míng)針(zhēn)孔形成點(diǎn)光(guāng)源對標本內焦平(píng)麵(miàn)的(dí)每(měi)一點掃描,標本上(shàng)的被照射(shè)點,在探(tàn)測(cè)針孔處(chǔ)成像,由探測(cè)針孔後的光(guāng)點(diǎn)倍(bèi)增(zēng)管(guǎn)或冷(lěng)電(diàn)耦器(qì)件逐(zhú)點(diǎn)或逐綫接(jiē)收,迅(xùn)速在計算(suàn)機(jī)監(jiān)視器屏幕(mù)上形(xíng)成(chéng)熒光(guāng)圖(tú)像。
照明針孔與探測針(zhēn)孔相對(duì)於物鏡(jìng)焦平(píng)麵是(shì)共(gòng)軛的,焦平(píng)麵(miàn)上(shàng)的點同(tóng)時聚焦(jiāo)於(yú)照(zhào)明針(zhēn)孔和發射針(zhēn)孔,焦(jiāo)平麵(miàn)以(yǐ)外的點不(bù)會(huì)在探(tàn)測針(zhēn)孔(kǒng)處成像(xiàng),這樣(yàng)得到的共聚焦圖像(xiàng)是(shì)標本的光(guāng)學(xué)橫(héng)斷麵,克服了普通顯微鏡圖像(xiàng)模糊(hū)的(dí)缺點。
優點(diǎn):
1,以激光為(wéi)光源,在相應的熒(yíng)光探針標(biāo)記後(hòu),對樣本(běn)進行(háng)逐點掃(sǎo)描,逐層(céng)獲得二維光學(xué)橫斷(duàn)麵圖(tú)像,具(jù)有(yǒu)“細胞CT”的功能(néng),並可(kě)通(tōng)過計算機三(sān)維重(zhòng)建(jiàn)軟件支持(chí),獲得三維圖像(xiàng),並(bìng)可以(yǐ)任(rèn)意(yì)角度(dù)旋轉(zhuǎn),觀察(chá)細(xì)胞(bāo),組織立(lì)體形態和空(kōng)間關係(xì);
2,可對(duì)細(xì)胞(bāo)膜(mó)的流(liú)動(dòng)性,細胞(bāo)間(jiān)通訊(xùn),細胞融合,細胞(bāo)骨架彈(dàn)性測量(liáng)等,這(zhè)一(yī)技術可(kě)以對活細胞和組(zǔ)織進(jìn)行原位(wèi)動(dòng)態定量的(dí)觀(guān)察和測(cè)量。
3,可(kě)以對(duì)活細胞和(hé)組織進行無(wú)損傷的觀(guān)察,動態(tài)測量細胞(bāo)內(nèi)的Ca離子(zǐ)濃度和(hé)pH值(zhí)等(děng)活細胞生(shēng)理信息(xī)。