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熒(yíng)光顯微鏡和(hé)激(jī)光(guāng)共(gòng)聚焦(jiāo)顯微(wēi)鏡(jìng)的區(qū)別

更新(xīn)時(shí)間(jiān):2022-09-21      點(diǎn)擊次數:5472

首先我們來簡(jiǎn)單(dān)了(liǎo)解一下熒光顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)和激(jī)光共(gòng)聚焦(jiāo)顯微鏡(jìng)的工(gōng)作原理。
熒光(guāng)顯微鏡(jìng)(Fluorescence microscope) :熒(yíng)光顯微(wēi)鏡是以(yǐ)紫外(wài)綫為光源,樣品自(zì)身(shēn)發(fā)光或(huò)者(zhě)經(jīng)過熒(yíng)光染(rǎn)料(liào)或(huò)熒(yíng)光抗體染色處理之(zhī)後,照射被(bèi)檢物體(tǐ),受紫外激發(fā)產生(shēng)熒光(guāng),探(tàn)測(cè)器(qì)檢測,在顯微(wēi)鏡下(xià)觀(guān)察物體的形狀(zhuàng)及其所在(zài)位(wèi)置(zhì)。熒光(guāng)顯微鏡(jìng)用(yòng)於研究細胞內物(wù)質的吸收,運輸(shū),化學物質的分布及(jí)定位(wèi)等(děng)。

激光(guāng)共(gòng)聚(jù)焦顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM):全稱是激光(guāng)掃(sǎo)描共聚焦熒光顯(xiǎn)微鏡,是一種利(lì)用計(jì)算(suàn)機,激光和(hé)圖像處(chǔ)理技術(shù)獲得生(shēng)物(wù)樣品三維數據,以激(jī)光作為光源,逐(zhú)點激(jī)發(fā)樣品(pǐn)內(nèi)熒(yíng)光(guāng),采(cǎi)用(yòng)精密(mì)針孔濾波(bō)技術(shù),有(yǒu)效(xiào)抑製了非(fēi)聚焦平(píng)麵(miàn)的雜散光,具有(yǒu)層析(xī)成像(xiàng)能力(lì)和(hé)很高的成(chéng)像信噪(zào)比(bǐ)。在熒(yíng)光(guāng)顯微鏡的基礎上(shàng)添(tiān)加了(liǎo)激光(guāng)掃描裝置(zhì),激(jī)光從發射(shè)器發(fā)出,在照明針(zhēn)孔分成三束,經(jīng)過分光(guāng)鏡反射(shè),在(zài)物(wù)鏡(jìng)處折射(shè),聚焦於(yú)樣品的(dí)焦平麵上(shàng),如(rú)果樣品中有被(bèi)激光激發(fā)的熒光基團(tuán),就(jiù)會(huì)產生熒光,按照激(jī)光進(jìn)入的(dí)光路原路(lù)返回,返回的(dí)熒光在(zài)成像係統(tǒng)(一(yī)種可(kě)以把光(guāng)信號(hào)轉化(huà)為(wéi)電信(xìn)號傳(chuán)感器(qì))中(zhōng)再(zài)次(cì)聚(jù)焦成(chéng)相(xiāng)。因為在(zài)兩(liǎng)個位置(zhì)(樣品(pǐn)和(hé)成像係統)聚(jù)焦(jiāo),所(suǒ)以叫做共聚(jù)焦。

熒光(guāng)顯微鏡(jìng)和激(jī)光(guāng)共(gòng)聚焦顯微(wēi)鏡(jìng)的區別(bié)

熒光顯微鏡和(hé)激(jī)光(guāng)共聚焦(jiāo)顯微(wēi)鏡的(dí)區(qū)別(bié)。

熒光顯(xiǎn)微鏡(jìng)又(yòu)叫(jiào)寬場熒光顯(xiǎn)微鏡,當成像麵(miàn)較(jiào)厚(hòu),焦麵(miàn)上方(fāng)下方的幹(gān)擾信號都(dū)會被觀察到,影響實(shí)驗結果(guǒ),因(yīn)此(cǐ)熒光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)隻能(néng)觀(guān)察靜(jìng)態的亞(yà)細(xì)胞(bāo)結構(gòu)。
激(jī)光(guāng)共聚(jù)焦(jiāo)顯(xiǎn)微鏡是在(zài)傳(chuán)統熒光顯微(wēi)鏡(jìng)成(chéng)像的(dí)基(jī)礎上(shàng),附加了(liǎo)激光(guāng)掃(sǎo)描裝(zhuāng)置和共軛(è)聚(jù)焦裝置(zhì),通過(guò)計(jì)算機(jī)控製來(lái)進(jìn)行數字(zì)化圖(tú)像采(cǎi)集和(hé)處理(lǐ)的(dí)係(xì)統(tǒng)。可以觀(guān)察(chá)亞(yà)細胞層(céng)次的(dí)一(yī)些生(shēng)化變化,是目前*分子(zǐ)細胞生(shēng)物(wù)學的分析儀(yí)器(qì)。
激光共聚(jù)焦顯(xiǎn)微鏡比普通熒(yíng)光(guāng)顯微鏡(jìng)獲(huò)得(dé)更(gēng)高(gāo)對(duì)比度(dù),高分辨率圖(tú)像,同時具(jù)有高(gāo)靈敏度(dù),對(duì)檢測(cè)樣(yàng)品(pǐn)無損傷,可靠和(hé)優良重(zhòng)復性(xìng)。激(jī)光共(gòng)聚(jù)焦(jiāo)顯微鏡具(jù)有更(gēng)高(gāo)的分(fēn)辨率(shuài),實(shí)現(xiàn)多重(zhòng)熒光(guāng)的同(tóng)時可觀察(chá)並可形(xíng)成(chéng)清(qīng)晰的三維(wéi)圖(tú)像等(děng)優點(diǎn),能(néng)比寬(kuān)場看(kàn)到的成(chéng)像(xiàng)麵更薄,更清晰,在較以往更短(duǎn)的采集時(shí)間(jiān)內輕鬆實(shí)現(xiàn)超高(gāo)分(fēn)辨率更(gēng)大觀(guān)察視野成像。

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